2014全國(guó)衛(wèi)生專業(yè)技術(shù)資格考試臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)與技術(shù)(中級(jí)) 核心考點(diǎn)通關(guān)訓(xùn)練 ..
- 所屬分類：
衛(wèi)生專業(yè)考..
- 作者：
專家編寫組 編著
- 出版社：
北京科學(xué)技術(shù)出版社
- ISBN：9787530455784
- 出版日期：2014-1-1
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原價(jià)：
￥56.00元
現(xiàn)價(jià)：￥0.00元
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圖書簡(jiǎn)介
第三節(jié) 血紅蛋白測(cè)定
[核心考點(diǎn)]氰化高鐵血紅蛋白測(cè)定法原理常考
血液在血紅蛋白轉(zhuǎn)化液中溶血后，除SHb外各種血紅蛋白均可被高鐵氰化鉀氧化為高鐵血紅蛋白，再與CN一結(jié)合生成穩(wěn)定的棕紅色氰化高鐵血紅蛋白。HiCN最大吸收波峰在540nm，最小吸收谷為504nm。特定標(biāo)準(zhǔn)條件下，毫摩爾消光系數(shù)為44mmol一。em一，因此根據(jù)標(biāo)本的吸光度，即求出血紅蛋白濃度。在沒有符合WHO標(biāo)準(zhǔn)的分光光度計(jì)的條件下，亦可用HiCN參考液制得標(biāo)準(zhǔn)曲線，或得出換算常數(shù)，間接計(jì)算血紅蛋白濃度(曠L)．
[核心考點(diǎn)]氰化高鐵血紅蛋白測(cè)定法方法學(xué)評(píng)價(jià)常考
HiCN法被列為國(guó)際血紅蛋白測(cè)定的參考方法。具有操作簡(jiǎn)單、顯色快、穩(wěn)定，除SHb外各種血紅蛋白均可檢測(cè)、讀取吸光度后可直接定值等優(yōu)點(diǎn)。缺點(diǎn)是KCN有劇毒，使用管理不當(dāng)可造成公害，此外高白細(xì)胞和高球蛋白血癥可致混濁，以及HbCO轉(zhuǎn)化較慢等問題。
[核心考點(diǎn)]氰化高鐵血紅蛋白測(cè)定法計(jì)算公式常考
lib(曠L)：A／44 x64458(mg)／1000 x251：A x367．7
式中A是在540nm處HiCN吸光度，64458mg是Hb的毫克分子量，1000是將毫克轉(zhuǎn)換為克，251是實(shí)驗(yàn)時(shí)血液的稀釋倍數(shù)。使用367．7常數(shù)是有條件的，是基于在儀器、比色杯、試劑及操作均嚴(yán)格的要求下，才能直接使用。
[核心考點(diǎn)]氰化高鐵血紅蛋白測(cè)定法注意事項(xiàng)常考
(1)轉(zhuǎn)化液應(yīng)儲(chǔ)存在棕色有塞玻璃瓶中，4~C可保存數(shù)月，不可0℃以下保存。
(2)KCN有劇毒，測(cè)定后的廢液以水稀釋，再加以次氯酸鈉35ml／L，放置15小時(shí)以上。
(3)白細(xì)胞過高或球蛋白異常可干擾檢測(cè)結(jié)果，白細(xì)胞過高離心后取上清液比色，球蛋白異常增高者比色液中加入少許固體NaCl或碳酸鉀，混勻后溶液澄清再比色。
[核心考點(diǎn)]十二烷基磺酸鈉血紅蛋白測(cè)定法原理
除SHb外，血液中各種Hb均可與低濃度SDS作用，生成SDS—Hb棕紅色化合物。其吸收曲線波峰：莊538nm，波谷在500nm，肩峰在560nm。由于摩爾消光系數(shù)尚未最后確認(rèn)，因此不能用吸光度A直接計(jì)算ub濃度。本法可用HiCN法定值的抗凝血或溶血液，制備標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，間接計(jì)算血紅蛋白濃度。
[核心考點(diǎn)]十二烷基磺酸鈉血紅蛋白測(cè)定法方法學(xué)評(píng)價(jià)
優(yōu)點(diǎn)：操作簡(jiǎn)單，呈色穩(wěn)定，準(zhǔn)確性和精確性符合要求，無公害。為次選方法。
缺點(diǎn)：SDS本身質(zhì)量差異較大且SDS破壞白細(xì)胞，不適于同時(shí)具有計(jì)數(shù)白細(xì)胞、Hb定量?jī)煞N功能和血細(xì)胞分析儀使用。
[核心考點(diǎn)]疊氮高鐵血紅蛋白測(cè)定法
具有與HiCN相似的優(yōu)點(diǎn)，最大吸收峰在542nm，且峰值高度幾乎與HiCN者重合，實(shí)驗(yàn)時(shí)顯色快且穩(wěn)定。試劑毒性僅為HiCN測(cè)定法的1／7，但仍存在公害問題。
[核心考點(diǎn)]堿羥血紅蛋白(AHD575)測(cè)定法
該法試劑簡(jiǎn)單，不含有毒劑。呈色穩(wěn)定，575nm為其檢出波長(zhǎng)。可用氯化血紅素做標(biāo)準(zhǔn)品。但由于自動(dòng)血細(xì)胞分析儀或血紅蛋白測(cè)定儀多采用540nm左右范圍濾光板(因?yàn)镠iCN最大吸收峰在540nm)，限制了此法在該類儀器的使用。
[核心考點(diǎn)]沙利酸化血紅蛋白測(cè)定法
操作簡(jiǎn)單但誤差較大，已被列為縣以上醫(yī)院淘汰的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目。
[核心考點(diǎn)]參考值常考
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