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《生物化學(xué)》考試大綱（803）

參考書目：《生物化學(xué)》第一版，李憲臻主編，華中科技大學(xué)出版社，2008

初試自命題考試科目：考試時間3小時，150分

第一章蛋白質(zhì)

一、蛋白質(zhì)是生命的物質(zhì)基礎(chǔ)

1.蛋白質(zhì)的生物學(xué)功能及分類。

2.蛋白質(zhì)的化學(xué)組成，以元素組成的特點及凱氏定氮的原理（轉(zhuǎn)換系數(shù)）。

二、氨基酸化學(xué)

1.氨基酸的結(jié)構(gòu)與分類，二十種氨基酸的結(jié)構(gòu)通式、中文名字及英文三字縮寫符號，氨基酸的分類，中性、酸性和堿性氨基酸，必需氨基酸。

2.氨基酸的理化性質(zhì)與應(yīng)用，一般理化性質(zhì)、兩性性質(zhì)（pI）、化學(xué)反應(yīng)(顯色、定性定量反應(yīng))，氨基酸分離與分析方法。

三、蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)

1.一級結(jié)構(gòu)，一級結(jié)構(gòu)、肽和肽鍵的概念，常見的活性肽，激素及多肽類激素的概念。

2.空間結(jié)構(gòu)，構(gòu)象與構(gòu)型的概念，蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)層次（1.2.3.4級結(jié)構(gòu)，超二級結(jié)構(gòu)及結(jié)構(gòu)域的概念與特點），維持蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)的化學(xué)鍵（次級健的種類與特點），蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)、空間結(jié)構(gòu)與功能關(guān)系。

3.蛋白質(zhì)的性質(zhì)與應(yīng)用

（1）蛋白質(zhì)的酸堿性質(zhì)，蛋白質(zhì)的兩性電離與等電點（帶電荷特性，電泳、離子交換）。

（2）蛋白質(zhì)大分子與膠體性質(zhì)，大小及分子量測定（凝膠過濾、超離心、SDS-PADE原理與方法），蛋白質(zhì)膠體的穩(wěn)定與破壞）。

（3）蛋白質(zhì)的沉淀，沉淀的概念、原理。熟悉蛋白質(zhì)（非變性與變性）沉淀的常用方法。

（4）蛋白質(zhì)的變性與復(fù)性的概念，變性蛋白質(zhì)的特征及意義（因素），復(fù)性的概念。

（5）蛋白質(zhì)的顏色反應(yīng)與應(yīng)用，定性定量測定蛋白質(zhì)的方法。

第二章酶

一、酶的概念與作用特點

1.生物學(xué)作用（酶的概念、作用、分布/胞內(nèi)與胞外，蛋白質(zhì)與非蛋白質(zhì)酶的概念。

2.酶催化作用的特點，專一性概念及表現(xiàn)形式，以及產(chǎn)生專一性的機理。高效性、條件依耐性與活性的可調(diào)性。

3.酶的分類及命名。

二、酶的化學(xué)本質(zhì)與結(jié)構(gòu)功能特點。

掌握酶的化學(xué)本質(zhì)、單純酶、結(jié)合（雙成分）酶、全酶、酶蛋白、輔助因子、輔酶、輔基的概念，以及輔酶的種類、結(jié)構(gòu)與功能。維生素的概念，維生素余輔酶的關(guān)系。結(jié)合（雙成分）酶各部分的功能特點。

酶的結(jié)構(gòu)與功能，酶的活性中心、必需基團(tuán)的概念與特征。

三、酶的作用機理

酶與底物結(jié)合的學(xué)說，酶作用高效率的機制。

五、酶促反應(yīng)動力學(xué)

酶促反應(yīng)動力學(xué)的概念與酶的反應(yīng)速率，掌握影響酶促反應(yīng)的因素（底物濃度、酶濃度、溫度、pH、酶濃度、激活劑、抑制劑等）。

1.底物濃度的影響：[S]對V影響的飽和曲線，米氏方程，Km與Vmax，Km的求法。

酶的最適pH，最適溫度的概念。

2.酶的抑制與激活：抑制作用的概念及分類、可逆與不可逆抑制作用的概念及分類，競爭性抑制、非競爭性抑制的概念及其動力學(xué)改變（對Km、Vm的影響），競爭性抑制作用的實例。了解激活劑的概念與分類，以及激活劑對酶促反應(yīng)速度影響的機制。

六、酶活性的調(diào)節(jié)控制與調(diào)節(jié)酶

酶活性調(diào)節(jié)的四種方式：別構(gòu)效應(yīng)的調(diào)控、可逆的共價修飾調(diào)控、酶原激活、激促蛋白質(zhì)或抑制蛋白質(zhì)的調(diào)控。

1.別構(gòu)效應(yīng)的調(diào)控

了解別構(gòu)酶的概念、性質(zhì)、結(jié)構(gòu)特點、別構(gòu)效應(yīng)、效應(yīng)物的概念與分類。熟悉別構(gòu)酶的動力學(xué)曲線特征以及別構(gòu)酶對酶反應(yīng)速度的調(diào)節(jié)，了解正協(xié)同與負(fù)協(xié)同效應(yīng)的概念與動力學(xué)特征，了解別構(gòu)酶的判定方法。

2.共價調(diào)節(jié)酶的特點與分類，寡聚酶、同工酶及誘導(dǎo)酶的概念。

七、蛋白質(zhì)與酶的分離、提純及活性測定

蛋白質(zhì)（酶）分離制備的基本程序，純化精制方法與原理及注意事項，蛋白質(zhì)含量測定及純度鑒定的方法及其原理，酶活力測定的原理與方法，酶活力與比活力的概念，酶活力單位的定義、表示方法與計算。

酶在食品、生工及醫(yī)藥學(xué)上的應(yīng)用，固定化酶的概念。

了解蛋白質(zhì)分離、純化的基本方法及其原理。

第三章核酸

一、核酸的概念和化學(xué)組成

核酸的概念、分類、生物學(xué)作用。核苷酸組成成分（堿基、戊糖、磷酸）的結(jié)構(gòu)特點、符號及其連接方式。兩類核酸分子組成的比較。環(huán)化核苷酸（cAMP、cGMP）及輔酶類核苷酸的結(jié)構(gòu)特點（NTP、NDP、NMP，dNTP，ddNTP）。

二、核酸的分子結(jié)構(gòu)

1.DNA的分子結(jié)構(gòu)：核酸的一級結(jié)構(gòu)、磷酸二酯鍵、核苷酸鏈的書寫規(guī)則。

基因與基因組，原核與真核基因組的特點。

DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的要點,堿基配對規(guī)則。

DNA的超螺旋、染色體結(jié)構(gòu)。

2.RNA的分子結(jié)構(gòu)：細(xì)胞內(nèi)RNA的主要種類，RNA分子組成特征，三類RNA（rRNA、tRNA、mRNA）的結(jié)構(gòu)特點，真核與原核mRNA結(jié)構(gòu)特點。

三、核酸的理化性質(zhì)：

核酸的紫外吸收性質(zhì)（260nm），DNA變性、復(fù)性及核酸雜交的概念（影響因素，三種核酸雜交的概念及應(yīng)用）。

第四章糖代謝

一、糖的概述，單糖、雙糖與多糖；還原糖與非還原糖（蔗糖，多糖）

多糖與淀粉，直鏈淀粉支鏈淀粉，糖原，（動物淀粉），纖維素，β－1.4鍵

淀粉的酶促降解：α淀粉酶；β淀粉酶；葡萄糖（G）淀粉酶；支鏈（Q）淀粉酶

淀粉酶作用的特點與化學(xué)建

二、糖酵解：

1.EMP途徑：生化途徑，重點為ATP消耗及產(chǎn)生部位，底物水平磷酸化。氧化還原部位及輔酶（NAD）不可逆反應(yīng)與糖異生途徑，關(guān)鍵調(diào)節(jié)酶、己糖激酶和丙酮酸激酶的調(diào)節(jié)。

2.厭氧發(fā)酵：乳酸與酒精發(fā)酵途徑的反應(yīng)過程、特點與應(yīng)用。

三、葡萄糖的有氧分解：

丙酮酸脫羧與三羧酸循環(huán)，丙酮酸脫羧，丙酮酸脫氫酶系（多酶復(fù)合體），輔因子。

三羧酸循環(huán)反應(yīng)過程與其他代謝途徑的關(guān)系：脫氫及能量的計算，該途徑的作用與意義。

三羧酸循環(huán)的回補反應(yīng)。

三羧酸循環(huán)不僅是產(chǎn)生ATP的途徑，其中間產(chǎn)物也是生物合成的前體。產(chǎn)生草酰乙酸有三個途徑：

1.丙酮酸在丙酮酸羧化酶催化下形成草酰乙酸，需要生物素為輔酶。

2.磷酸烯醇式丙酮酸在磷酸烯醇式丙酮酸羧化激酶的催化下形成草酰乙酸。

3.天冬氨酸及谷氨酸的轉(zhuǎn)氨作用可以形成草酰乙酸和α-酮戊二酸。

谷氨酸、天冬氨酸是從α-酮戊二酸、草酰乙酸衍生而成。草酰乙酸必須不斷補充。

注意：檸檬酸與味精（谷氨酸）發(fā)酵：實現(xiàn)的條件(生化途徑、開源與節(jié)流)。

四、磷酸戊糖途徑（pentosephosphatepathway,PPP），也稱為磷酸己糖旁路（hexosemonophosphatepathway/shunt,HMP）的途徑與意義。生成還原力NADPH，其特代謝提供碳架

1.第一階段（氧化。兩次脫氫（NADP），脫CO2,生成磷酸戊糖。

2.第二階段磷酸戊糖分子重排，產(chǎn)生不同碳鏈長度的磷酸單糖，可進(jìn)入酵解途徑。

糖異生的概念。

第五章生物氧化

一、生物氧化的概念，生物體產(chǎn)生ATP的方式與意義（底物水平磷酸化，氧化磷酸化）。

二、生物氧化的基本過程：逐步分解，脫羧（CO2）、脫氫，傳氫，受氫與H2O的生成。

三、氧化磷酸化（電子傳遞磷酸化）；電子傳遞鏈的組成（NADH和FADH2兩種）分布（線粒體）電子傳遞鏈的作用，氧化磷酸化的過程，ATP產(chǎn)生的機理（化學(xué)滲透學(xué)說）。

四、P/O(磷氧比)與一分子NADH或FADH2產(chǎn)生ATP的數(shù)量（3；2）。

五、電子傳遞抑制劑，氧化磷酸化抑制劑，解偶聯(lián)劑（2.4－二硝基苯酚）。

第六章脂肪代謝

一、脂類的概念，種類：脂肪（三酰基甘油，真脂）類脂

脂肪，脂肪酸，必需脂肪酸。

脂肪的分解代謝，脂肪的酶促降解。

二、脂肪酸β氧化是重點（部位，酶，輔酶FANH2/DANH）產(chǎn)物是乙酰CoA（去路）。

乙酰CoA去路：三羧酸循環(huán)產(chǎn)能，合成脂肪，酮體代謝）。

三、脂肪酸從頭合成（在細(xì)胞質(zhì)中進(jìn)行）乙酰CoA羧化生成丙二酸單酰CoA乙酰CoA羧化酶可分成，軟脂酸（16碳）的合成：多酶體系，以NADPH作還原劑的逐步還原合成過程。

延長階段（在線粒體和微粒體中進(jìn)行）。

脂肪的生物合成：甘油＋脂肪酸

體內(nèi)脂肪合成的乙酰CoA來至于糖、脂肪、氨基酸（蛋白質(zhì)）。如高脂肪及高糖食物。

第七章氨基酸代謝

一、蛋白質(zhì)的降解：氨基酸庫，人體八種必需氨基酸。

二、氨基酸的共同降解途徑。

脫氨基作用：氧化脫氨基作用（脫氫脫氨基，Glu脫氫酶）

氨基酸轉(zhuǎn)氨作用轉(zhuǎn)氨酶（輔酶VB6）：谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT）和谷草轉(zhuǎn)氨酶（GOT）。

聯(lián)合脫氨基作用：轉(zhuǎn)氨作用與氧化脫氨作用相偶聯(lián)/轉(zhuǎn)氨作用與嘌呤核苷酸（AMP）循環(huán)相偶聯(lián)

氨的去路與排泄，成酰胺：GlnAln，生成氨甲酰磷酸：

尿素循環(huán)生成尿素——人與多數(shù)動物主要的氨排泄形式

α-酮酸的代謝：生糖氨基酸/生酮氨基酸

蛋白質(zhì)與糖、脂肪代謝相互聯(lián)系、相互轉(zhuǎn)化。

三、氨基酸的合成：

還原氨基化，α-酮戊二酸＋NH3＋NADPH＝GluGlu脫氫酶。

轉(zhuǎn)氨作用與聯(lián)合脫基化，味精（谷氨酸）發(fā)酵生化途徑特點。

第八章核苷酸代謝

一、核酸分解生成核苷酸、嘌呤核苷酸的降解（尿酸與痛風(fēng)病）。嘌呤核苷酸的降解。

二、核苷酸的生物合成：嘌呤核苷酸和嘌呤核苷酸從頭合成的原料。

應(yīng)急（半）合成的概念/一碳單位的代謝：FH4（THFA）

第九章DNA的復(fù)制合成

一、DNA的復(fù)制合成的特點：

分子生物學(xué)的中心法則。

DNA的半不保留復(fù)制、半不連續(xù)復(fù)制（岡奇片斷，前導(dǎo)鏈、后隨鏈、相應(yīng)模板鏈以及復(fù)制叉的移動方向）。

DNA聚合酶的作用特點：模板、引物、原料；DNA聚合酶。

二、原核生物的DNA復(fù)制

原核DNA聚合酶三種：DNA聚合酶Ⅰ、DNA聚合酶Ⅱ和DNA聚合酶Ⅲ（三種不同的活性）/復(fù)制的起始：oriC、解旋酶（拓?fù)洚悩?gòu)酶）、單鏈結(jié)合蛋白（SSB蛋白）/引物RNA與引物（發(fā)）酶（primase）/DNA聚合酶Ⅰ（引物切除與補充）、DNA連接酶。

三、真核生物DNA的復(fù)制

真核生物的DNA聚合酶：動物細(xì)胞含有至少5種DNA聚合酶α、β、γ、δ和ε各自的作用，多個起始點：端粒和端粒酶。

四、DNA的反轉(zhuǎn)錄合成。

五、DNA損傷與修復(fù)概念、修復(fù)的種類與本質(zhì)（切割、合成與連接）。

六、DNA重組與基因工程：分、切、接、轉(zhuǎn)、篩。

七、PCR聚合酶鏈反應(yīng)：概念、過程（變性、退火、延伸），DNA的酶法測序：ddNTP的作用。

第十章RNA的生物合成

一、RNA的生物合成的特點：不對成合成：二中轉(zhuǎn)一，模板鏈（W）、編碼鏈（C）。

分段以轉(zhuǎn)錄單位進(jìn)行：起始、終止。原核多為多順反子、真核為單順反子。

RNA聚合酶：5’→3’聚合酶活性，不需引物，需要模板。

二、原核RNA轉(zhuǎn)錄合成：

原核RNA聚合酶：ααββ’σ，(全酶/核心酶)。

原核RNA轉(zhuǎn)錄單位特點:啟動子(promartor)－10區(qū)，－35區(qū)；結(jié)構(gòu)基因；終止子。

原核RNA轉(zhuǎn)錄合成：起始、延伸與終止。

三、原核生物基因表達(dá)調(diào)控――轉(zhuǎn)錄調(diào)控

乳糖操縱子模型乳糖操縱子的組成（結(jié)構(gòu)基因，啟動子P、操作子O、CAP；調(diào)節(jié)基因Ilac）。乳糖的誘導(dǎo)機制，誘導(dǎo)物與安慰性誘導(dǎo)物（IPTG）。

四、真核細(xì)胞的RNA轉(zhuǎn)錄合成：真核RNA聚合酶Ⅰ；真核RNA聚合酶Ⅱ，真核RNA聚合酶Ⅲ

真核RNA聚合酶Ⅱ與mRNA的轉(zhuǎn)錄，轉(zhuǎn)錄因子————――——反式作用因子。

真核核心啟動子（－25區(qū)；－75區(qū)）；上游序列（UPS）―――順式作用元件。

五、RNA轉(zhuǎn)錄后的加工（成熟與編輯作用）切割、拼接、與修飾。

真核mRNA的編輯作用：切除內(nèi)涵子連接外顯子，加帽、加尾。

真核mRNA與原核mRNA的比較。

第十一章蛋白質(zhì)的生物合成

mRNA指導(dǎo)下，以遺傳密碼為依據(jù)，逐步催化相應(yīng)氨基酸形成肽鍵，合成肽鏈的過程。

一、參與蛋白質(zhì)生物合成三類RNA與蛋白質(zhì)因子。

rRNA和核糖體：原核核糖體/真核核糖體。

tRNA三葉草結(jié)構(gòu)、反密碼環(huán)與反密碼子、氨基酸接受臂CCA3’。

mRNA真核mRNA與原核mRNA的比較。

蛋白質(zhì)因子：（1）起始因子（initiation factors IF）：（2）延長因子（elongatin factors EF）：（3）釋放因子（rleease factors RF）等。

二、遺傳密碼字（coden）：為一個氨基酸進(jìn)入多肽鏈特定線形位置的三個核苷酸單位。

遺傳密碼的特點：不重疊性、無標(biāo)點、不停頓、單方向性，簡并性、通用性（偏倚性（codeusagebias），特例（偏離））。

三、蛋白質(zhì)生物合成過程(原核)

氨基酸活化――氨酰tRNA的生成，氨酰tRNA合成酶:tRNAfmet；tRNAmet。

在核糖體上合成肽鏈。

（1）起始，起始復(fù)合物的形成核糖體（30S＋50S）＋mRNA＋tRNAfmet。

（2）延伸：①進(jìn)位②成肽③移位。

（3）終止與釋放。

四、真核細(xì)胞蛋白質(zhì)合成的特點。

五、多肽鏈合成后的加工修飾：

1.一級結(jié)構(gòu)的加工修飾：⑴N端甲酰蛋氨酸或蛋氨酸的切除：②去蛋氨酰基。

⑵氨基酸的修飾：⑶二硫鍵的形成：⑷肽段的切除：由專一性的蛋白酶催化，將部分肽段切除。

2.高級結(jié)構(gòu)的形成：⑴構(gòu)象的形成，分子內(nèi)伴侶、輔助酶。⑵亞基的聚合。⑶輔基的連接。靶向輸送：蛋白質(zhì)合成后，定向地被輸送到其執(zhí)行功能的場所稱為靶向輸送。